先天性肌营养不良（congenitalmusculardystrophy,CMD），是一组强异质性的常染色体隐性遗传性肌肉疾病，指出生时或出生后数月内出现的原发性、进行性肌病。肌肉病理表现为肌营养不良的特征性改变，即肌纤维大小不等，可见小而圆的肌纤维，肌间质增生等，但变形、坏死及再生等改变没有发病较晚的DMD等明显。根据受影响蛋白种类，目前共有34种基因定义的CMD形式，大致可以分为三类。第一类是由编码基底膜或细胞外基质蛋白或细胞外基质蛋白受体的基因突变引起的；第二类是直接或间接地参与糖基化途径的基因突变引起的，通常与神经元迁移缺陷有关。最不常见的形式是由编码细胞内和核蛋白的基因突变引起的。
图1肌膜模式图显示了引起部分CMD及LGMD的基因产物的位置
先天性肌营养不良是一种临床和遗传异质性的常染色体隐性疾病，本文开展了一项全国性的研究，以确定CMD在中国的人群频率，并评估中国人群CMD诊断和疾病管理的状况。从29个一级行政区(省、市、自治区、特别行政区)的34医院的数据库中选出病例。这项研究包括名同意接受基因检测的患者，其中名患者发现了突变。其中最常见的形式为LAMA2相关的CMD(36.4%)，其次为COL6相关的CMD(23.2%)和α-糖基化障碍(21.0%)。与LMNA和SEPN1突变相关的CMD较少（分别为12.5%和2.4%）。文献中还记录到中国各地区在CMD诊断能力和疾病管理方面存在显著差异，在欠发达地区相对落后。据了解，这是迄今为止最大样本规模的一次中国CMD流行筛查。CMD的患病率和相对频率尚不清楚，发病率在意大利约为0./10万，而在英格兰北部约为0.89/10万。因为中国是世界上最大的发展中国家，所以本文中研究者设计这一全国性的研究，以确定CMD在中国人群中的亚型和在中国临床实践水平上评估诊断和疾病管理的现状，有助于对CMD的全球发病率进行预测。首先，研究者在传统按地理区域划分的六区（北部、东北、西北、东部、南部、总部、西南部）的基础上，将省份有着相似的经济发展、社会习俗和气候特征的部分地区进行合并。由于调查不便，将海南岛排除在外，其他32个城市，自治区和特别行政区中的90.6%（29/32）参加了该项研究。这些地区的34家医院参加了本项研究。该研究设计了三个阶段。首先所有在-年期间诊断为CMD的注医院接受了随访。其中CMD患者的诊断标准，基于临床和活检结果的结合。先证者会进行活检（层粘连蛋白α2，糖基化α-糖基聚糖和胶原蛋白VI的免疫组化）。在分子遗传学检测中，使用sanger测序，Long-PCR，TP-PCR，NGS等对先证者和其家系进行检测。年至年期间，该检测包不断更新。平均覆盖倍数为.88，覆盖范围大于20。在先证者和家庭成员中，Sanger测序证实了候选的致病变异。在研究期间，该研究评估了在34医院住院的名病人。其中例符合纳入标准(男例，女例；图1A)。在接受基因检测的患者中，名患者接受sanger测序，名患者接受NGS神经肌肉相关基因检测，22名患者接受全外显子检测。利用分子遗传学检测技术，在例患者中有例患者进行遗传学诊断，其中12例可以明确诊断（遗传学诊断例，未经过基因筛选54例，无分子诊断后遗传学分析54例；图1B）。根据检测结果可以发现，67.6%的患者（n=）为隐性遗传。通过对检测结果进行分析，例患者被归为LAMA2相关的CMD，占全部患者的36.4%。所有病例的表型均符合LAMA2相关CMD典型表型，包括脑MRI上的白质高强度。在同意接受基因测试的病人（n=）中，有名例患者检测到基因突变。（图B）95例(23.2%)患者的表型与COL6相关的CMD相一致。虽然所有与COL6相关的患者均有运动里程碑延迟和低张力的表现，但在疾病的严重程度和病程上都有很大的异质性。95例COL6相关CMD表型患者同意进行基因检测，其中72例发生突变。而在72例发生突变的患者中，50例为常染色体显性遗传，22例为常染色体隐性遗传。其中29例为COL6A2突变，22例为COL6A1，21例为COL6A3突变。（图B）86例(21.0%)患者的为α-糖基化障碍导致CMD，其诊断主要为上下肢的无力虚弱和血清肌酸激酶水平升高，个别病例存在受累于血清肌酸激酶水平升高的中枢神经系统和眼部症状。在86例患者的基因检测中发现44例发生突变，其中POMGnT1最常见，占25.0%。其次是POMT2，FKRP，POMT1，ISPD，FKTNandB3GALNT2（18.2%,15.9%,13.6%,13.6%,11.4%and2.3%,）。（图B）51例（12.5%）患者有先天性肌营养不良表现，并伴有垂头综合征或其它临床症状。46名患者进行基因检测，其中42名患者发现存在LMNA新生突变。（图B）
10例（2.4%）患者出现行走延迟，脊柱强直和呼吸障碍，临床表型符合RSMD1。血清肌酸激酶水平正常或稍稍升高。其中6例基因检测发现SEPN1基因突变。（图B）
18例患者符合CMD入选标准，但不符合上述任何主要类型。其中两例患者检测到RYR1基因致病性突变，但缺乏典型的肌肉活检证据，不过在组织学和临床图像上具有CMD特性。这表明RYR1基因突变可能表现先天性肌病和CMD共同特征。（图B）
该文献对名中国CMD患者的出生地进行了分析，发现这些病人来自全国各地，个体与地域之间没有明显的关联性。文中记录了中国不同地区对CMD的诊断能力和疾病管理，发现在欠发达地区（西南、东北和西北）相对落后于发达地区（北部，东部，中南部）。在例已经确诊的LAMA2相关的CMD患者中，第一次住院到遗传诊断的平均间隔为18.1个月（1个月至12年）。由于临床资源和经济较差，我国部分欠发达地区的患者获得及时诊断和疾病管理的机会较少，医院咨询专家，导致恶性进展的可能性的可能性更高。
该研究的研究者设计了三阶段研究，克服了诊断不足的潜在障碍，使研究尽可能准确地记录了CMD中国人群的频率。据估计，最高患病率为0./10万（北京），最低为0./10万，远低于发达国家报道的水平。但由于中国目前对于CMD的诊断意识和疾病管理都不完善，无法确定CMD的真实流行程度和发病率。这些不足只能通过病人登记、组织医医院间的CMD网络等有效的机制来解决。
本文研究发现，国内CMD发病情况中LAMA2相关(36.4%)是最常见的，其次为COL6相关(23.2%)和α-糖基化障碍相关(21.0%)。该数据与其他亚洲区域有所不同，相反与欧洲早期的研究结果有些相似。而在α-糖基化障碍中，最常见的表型是多系统参与的大脑结构和眼睛异常，与认知障碍相关。而这些表型在意大利和英国也是最常见的。而根据欧洲的分子遗传分析经验，结合WES技术来调查我们未解决的病例，这有可能帮助帮助跟多患者找到可识别的致病性突变。
目前国内儿童神经肌肉病研究中心，通常使用NGS作为一线调查方法，而侵入性肌肉活检提供了第二线调查方法，在病人的初步基因检测阴性，以帮助指导进一步的调查。而肌肉活检也可以根据蛋白质水平来验证新变异体的致病性。尽管基因诊断有着巨大的优势，但仍有一部分CMD患者仍未得到解决。有些人可能携带已知基因的变异，由于GC含量高的区域覆盖率低或外显子1覆盖率低而被忽略，所以基因的检测需要sanger作为验证；而有些变异可能存在深度的非编码变异，对剪接、外显子跳跃或延伸有影响，因此，进一步的转录组测序是检测和解释这些变异的有意义的补充。而LAMA2相关CMD患者的基因检测中发现存在致病性拷贝数变异，而NGS无法检测到这种复杂的遗传异常，需要进行MLPA检测来对变异位点进行检测。由于神经肌肉疾病的新的遗传原因正在被发现，我们也强调对NGS数据的重新分析和正在进行的肌病检测包的更新。
本次研究，据了解是同类型研究中，样本规模最大、覆盖地区最广的CMD研究。随着经济的飞速发展，国内医疗卫生事业也在蓬勃法阵，对于罕见病的治疗以及研究也在随之不断进步。希望在未来的研究中，可以完善全国CMD网络，来改善国内CMD的疾病诊断和管理。
本公司非常荣幸作为第三方检测机构参与到这次非常有意义的研究中，我单位也愿意更多的协助临床上的各位老师进行相关疾病研究，也希望能在遗传病的研究中尽一份力，为祖国的医疗卫生事业发展做到我们应做的贡献。参考文献
1.GeLin,ZhangCheng,WangZhaoxiaetal.CongenitalmusculardystrophiesinChina.[J].Clin.Genet.,,96:-.
2.熊晖[1],袁云[2],吴希如[1].先天性肌营养不良的研究进展[J].中华儿科杂志,(12).
8年丰富临床服务经验
分子遗传学检验领导品牌
提供全技术平台解决方案
基于人工智能的生物信息分析体系
内容丰富贴近临床的检测报告
业内最短的报告周期
专业的遗传咨询服务体系
北京康旭医学检验所
海淀区杏石口路益园文创基地C区10号楼
-转
